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液相色譜分析中等度和梯度的區(qū)別?

更新時間:2024-11-05

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在液相色譜分析洗脫,分為等度洗脫和梯度洗脫

等度:流動相組成不變通常適用于單一組分或簡單組分混合物的分離,如藥物主成分含量測定;

梯度:流動相比例隨時間變化通常適用于復(fù)雜組分混合物的分離,如藥物雜質(zhì)分析。

等度和梯度的優(yōu)缺點(diǎn)?

等度洗脫:

優(yōu)點(diǎn):流速不發(fā)生變化,壓力穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

缺點(diǎn):多組分檢測或有雜質(zhì)干擾情況下分離度可能會差,而且不容易優(yōu)化,對于某些復(fù)雜樣品分析時間長,峰形差


梯度洗脫

優(yōu)點(diǎn):

a. 多組分檢測或有雜質(zhì)干擾情況下提高分離能力

b. 縮短某些復(fù)雜樣品的分析時間

c. 改善峰形,減少拖尾

d. 提高柱效,增加檢測靈敏度

缺點(diǎn):

a. 梯度洗脫方法運(yùn)行后都需要重新平衡液相色譜柱,耗時較長

b. 由于不同的液相色譜儀存在不同的體積滯后,所以梯度洗脫方法在不同儀器間轉(zhuǎn)移時可能會出現(xiàn)分離結(jié)果的差異

c. 流速變化得由程序控制,有時會出錯

d. 壓力可能會不穩(wěn)定

e. 混合時可能會產(chǎn)生氣泡,影響基線噪聲及漂移

f. 高壓混合時可能會產(chǎn)生熱量

g. 對混合器要求很高,如果混合不好,基線噪聲和漂移會很大

h. 由于流動相比例發(fā)生變化,基線可能會漂移

i. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性沒有等度高

j. 故障率高于等度



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